▎使用方法：
DNA 转染
1. 转染前一天细胞接种于合适的器皿，使其在转染时密度为 70-80%。
2. 在进行转染前，更换新鲜的培养液。
3. 转染试剂/DNA 混合物制备：
(1) DNA-Opti-MEM：在 1.5 mL 无菌离心管中加入 25 μL Opti-MEM 或其他无血清、无抗生素培养基，并添加 0.5 μg DNA（以 24 孔板每孔转染 0.5μg DNA 为例，参见表 1），用移液器轻 轻混匀。
(2) 转染试剂-Opti-MEM：在另一个 1.5 mL 无菌离心管中加入 25 μL Opti-MEM 或其他无血清、无抗生素培养基，并添加 0.5-2.5 μL 转染试剂（通常转染试剂（μL）:质粒 DNA（μg）比例为 1:1-5:1，推荐使用 3 μL 转染试剂/μg DNA），用移液器轻轻混匀。
(3) 将转染试剂-Opti-MEM 滴加至 DNA-Opti-MEM 中，用移液器轻轻混匀，室温静置 10-15 min 后可用于转染。
注意：上表推荐转染比例为 3 μL 转染试剂/μg DNA，因不同的细胞类型和培养条件，最佳的转染条件不同，可在转染试剂（μL）: 质粒 DNA（μg）为 1:1-5:1 的范围内自行优化转染条件。
4. 转染：将转染试剂/DNA 混合物滴加至培养基中，轻轻晃动培养器皿使转染试剂/DNA 均匀分散。
5. 继续培养 24-72 h，收取细胞，用适当的方法进行检测。
siRNA 转染
注意：siRNA 转染在转染效率较高的细胞中效果更佳，建议先进行预实验评估。
1. 转染前一天细胞接种于合适的器皿，使其在转染时密度为 70-80%。
2. 在进行转染前，更换新鲜的培养液。
3. siRNA 配制：将 siRNA 用 RNase-free H2O 配制成 20 μM 储存液。
4. 转染试剂/siRNA 混合物制备：
(1) siRNA-Opti-MEM：在 1.5 mL 无菌 RNase-free 离心管中加入 25 μL Opti-MEM 或其他无血清、无抗生素培养基，并添加 1μL 20μM siRNA 储存液（以 24 孔板每孔转染 20 pmol siRNA 为 例，参见表 2），用移液器轻轻混匀。
(2) 转染试剂-Opti-MEM：在另一个 1.5 mL 无菌 RNase-free 离心管中加入 25 μL Opti-MEM 或其他无血清、无抗生素培养基，并添加 0.8-2 μL 转染试剂（通常转染试剂（μL）:siRNA（10 pmol） 比例为 0.4:1-1:1，推荐使用 0.6 μL 转染试剂/10 pmol siRNA），用移液器轻轻混匀。
(3) 将转染试剂-Opti-MEM 滴加至 siRNA-Opti-MEM 中，用移液器轻轻混匀，室温静置 10-15 min 后可用于转染。
注意：上表推荐转染比例为 0.6 μL 转染试剂/10 pmol siRNA，因不同的细胞类型和培养条件，最佳的转染条件不同，可在转染试剂（μL）:siRNA（10 pmol）为 0.4:1-1:1 自行优化转染条件。
5. 转染：将转染试剂/siRNA 混合物滴加至培养基中，轻轻晃动培养器皿使转染试剂/DNA 均匀分散。
6. 继续培养 24-72 h，收取细胞，用适当的方法进行检测。
▎注意事项 ：
1. 使用高纯度的、无内毒素的 DNA 或 siRNA 有助于获得较高的转染效率。
2. 需使用无抗生素和无血清培养液配制转染试剂/核酸混合物，避免反应体系中存在抗生素或血清而干扰转染试剂与 DNA（siRNA）形成混合物。
3. 转染前细胞必须处于良好的生长状态。
4. 转染试剂不宜涡旋振荡或离心，应缓慢晃动混匀。
5. 转染后无需去掉混合物或更换培养基，如果转染后需要更换新鲜培养基，可在加入混合物 4-12 h 后更换生长培养基，不会降低转染活性。
6. 转染试剂使用后请立即盖好盖子，避免长时间暴露在空气中，影响转染效率。
7. 转染 siRNA 时，所有耗材均需要是 RNase-free。
8. 本产品仅供科学研究使用，不适用于临床诊断。
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