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LeanV Ultra-sensitive Cell Counting Kit-8 (CCK-8)

目录号:ZZ106

LeanV Ultra-sensitive Cell Counting Kit-8(CCK-8)是基于高度水溶性的四唑盐WST-8来进行测定的。WST-8 在电子介体的作用下可被细胞中的脱氢酶还原生成水溶性甲瓒产物,产生颜色反应,其甲瓒产物为橙色,可溶于组织培养基中。CCK-8是非放射性的,可在细胞增殖和细胞毒性实验中,对活细胞进行灵敏的比色测定,从而计算出细胞数量。细胞中脱氢酶产生的甲瓒产物的量与活细胞的数量成正比,可用于检测细胞增殖和细胞毒性。CCK-8试剂检测灵敏度高于其他四唑盐(例如 MTT、XTT、MTS或WST-1)。

价 格 ¥210

LeanV Ultra-sensitive Cell Counting Kit-8 (CCK-8)

¥210

ZZ106-2mL

¥ 210

ZZ106-10mL

¥ 980

产品规格 请选择

产品描述 使用方法 FAQ 说明书下载

▎产品简介 :

LeanV Ultra-sensitive Cell Counting Kit-8(CCK-8)是基于高度水溶性的四唑盐WST-8来进行测定的。WST-8 在电子介体的作用下可被细胞中的脱氢酶还原生成水溶性甲瓒产物,产生颜色反应,其甲瓒产物为橙色,可溶于组织培养基中。CCK-8是非放射性的,可在细胞增殖和细胞毒性实验中,对活细胞进行灵敏的比色测定,从而计算出细胞数量。细胞中脱氢酶产生的甲瓒产物的量与活细胞的数量成正比,可用于检测细胞增殖和细胞毒性。CCK-8试剂检测灵敏度高于其他四唑盐(例如 MTT、XTT、MTS或WST-1)。

▎产品组分 :

组分ZZ106-200rxnsZZ106-1000rxns

LeanV CCK-8 Solution

2 mL

10 mL


▎产品优势:

v 简单即用:即用型试剂,仅需加样、孵育、测OD三步,无需溶解结晶,操作极为简便。

v 灵敏稳定:灵敏度优于MTT,即便微量原代细胞亦可稳定检测;细胞毒性低,支持延长孵育时间及分次读数,实验窗口宽,结果稳定可靠。

v 安全高效:水溶性显色产物,不含DMSO,操作安全且误差小;无放射性风险,适配大规模高通量筛选实验。

▎储存条件 :

4℃避光保存12个月,-20℃至少24个月。冰袋运输。

▎使用方法:

v   制作标准曲线

1. 先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞;

2. 按比例依次用培养基等比稀释细胞,一般要做5-7个细胞浓度梯度,每组4-6个复孔;

3. 接种后培养贴壁细胞或悬浮细胞0.5-4 h,每100μL培养基加10μL CCK-8试剂,培养一定时间后测定OD450值,制作出一条以细胞数量为横坐标,OD450值为纵坐标的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量。使用此标准曲线的前提条件是试验条件完全一致。

v   细胞活性检测

1. 在96孔板中接种细胞悬液(100 μL/孔),将板在培养箱中预先培养;

2. 在每孔中加入10μL CCK-8溶液,注意不要将气泡引入孔中,因为它们会干扰OD值读取;

3. 在培养箱中将平板孵育0.5-4 h;时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定;

4. 使用酶标仪测量450nm处的吸光度。

v   细胞增殖/毒性检测方案

1. 在96孔板中接种100μL细胞悬液(5,000个细胞/孔),将板在培养箱中预培养24 h;

2. 在平板中加入1-10μL各种浓度的待测物质;

3. 在培养箱中将平板孵育适当的时间(例如 6、12、24 或 48 h);

4. 向板的每个孔中加入10μL CCK-8溶液,注意不要引入气泡,因为它们会干扰OD值读取;

5. 在培养箱中将平板孵育0.5-4 h;时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定;

6. 使用酶标仪测量450 nm处的吸光度。

v   结果计算

细胞存活率=[(As-Ab)/(Ac-Ab)]×100%

抑制率=[(Ac-As)/(Ac-Ab)]×100%

As:实验孔吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液和药物溶液);

Ac:对照孔吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液,不含药物);

Ab:空白孔吸光度(含培养基、CCK-8溶液,不含细胞、药物)。

▎注意事项 :

1. CCK-8对细胞的毒性相当低,因此细胞在CCK-8法检测后还可用于其他后续分析。

2. 如果OD值太低,可以采取适当增加细胞数量或者延长加入CCK-8后的孵育时间的办法。

3. 试剂盒依赖于脱氢酶催化的反应,影响活细胞中脱氢酶活性的条件或化学物质如还原剂会干扰检测。如果由于长期培养而改变了培养基的颜色或pH,请在添加CCK-8时更换培养基。



 


FAQ

1. 该产品比较敏感,偶有OD值偏高的现象,应该如何处理? 

(1)用不同数目的细胞进行检测,制作标准曲线,确定合适的细胞数目;

(2)缩短加入CCK-8的孵育时间;

(3)减少CCK-8的上样量,使CCK-8稀释到合适浓度使用。

2. 如何判断本品的检测范围? 

建议用自己的不同的细胞个数先做标准曲线,根据稳定线性趋势,确定特定细胞的检测数量区间。

3. 细胞毒性实验如何设置? 

(1)100 μL细胞悬液中加入1-10 μL各种浓度的待测物质,孵育适当时间后,再加入10 μL CCK-8溶液(即总体积的10%);

(2)先将待检测物质作用细胞一段时间后,再利用CCK-8检测细胞增殖情况。

4. OD值在什么范围比较合适? 

一般情况下OD值在 0.1-2.0 都可以,在1.0附近比较好。一般可将对照孔吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液,不含药物)的OD值控制在0.8-1.0左右,确定细胞的检测数量。




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产品描述

▎产品简介 :

LeanV Ultra-sensitive Cell Counting Kit-8(CCK-8)是基于高度水溶性的四唑盐WST-8来进行测定的。WST-8 在电子介体的作用下可被细胞中的脱氢酶还原生成水溶性甲瓒产物,产生颜色反应,其甲瓒产物为橙色,可溶于组织培养基中。CCK-8是非放射性的,可在细胞增殖和细胞毒性实验中,对活细胞进行灵敏的比色测定,从而计算出细胞数量。细胞中脱氢酶产生的甲瓒产物的量与活细胞的数量成正比,可用于检测细胞增殖和细胞毒性。CCK-8试剂检测灵敏度高于其他四唑盐(例如 MTT、XTT、MTS或WST-1)。

▎产品组分 :

组分ZZ106-200rxnsZZ106-1000rxns

LeanV CCK-8 Solution

2 mL

10 mL


▎产品优势:

v 简单即用:即用型试剂,仅需加样、孵育、测OD三步,无需溶解结晶,操作极为简便。

v 灵敏稳定:灵敏度优于MTT,即便微量原代细胞亦可稳定检测;细胞毒性低,支持延长孵育时间及分次读数,实验窗口宽,结果稳定可靠。

v 安全高效:水溶性显色产物,不含DMSO,操作安全且误差小;无放射性风险,适配大规模高通量筛选实验。

▎储存条件 :

4℃避光保存12个月,-20℃至少24个月。冰袋运输。

使用方法

▎使用方法:

v   制作标准曲线

1. 先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞;

2. 按比例依次用培养基等比稀释细胞,一般要做5-7个细胞浓度梯度,每组4-6个复孔;

3. 接种后培养贴壁细胞或悬浮细胞0.5-4 h,每100μL培养基加10μL CCK-8试剂,培养一定时间后测定OD450值,制作出一条以细胞数量为横坐标,OD450值为纵坐标的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量。使用此标准曲线的前提条件是试验条件完全一致。

v   细胞活性检测

1. 在96孔板中接种细胞悬液(100 μL/孔),将板在培养箱中预先培养;

2. 在每孔中加入10μL CCK-8溶液,注意不要将气泡引入孔中,因为它们会干扰OD值读取;

3. 在培养箱中将平板孵育0.5-4 h;时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定;

4. 使用酶标仪测量450nm处的吸光度。

v   细胞增殖/毒性检测方案

1. 在96孔板中接种100μL细胞悬液(5,000个细胞/孔),将板在培养箱中预培养24 h;

2. 在平板中加入1-10μL各种浓度的待测物质;

3. 在培养箱中将平板孵育适当的时间(例如 6、12、24 或 48 h);

4. 向板的每个孔中加入10μL CCK-8溶液,注意不要引入气泡,因为它们会干扰OD值读取;

5. 在培养箱中将平板孵育0.5-4 h;时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定;

6. 使用酶标仪测量450 nm处的吸光度。

v   结果计算

细胞存活率=[(As-Ab)/(Ac-Ab)]×100%

抑制率=[(Ac-As)/(Ac-Ab)]×100%

As:实验孔吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液和药物溶液);

Ac:对照孔吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液,不含药物);

Ab:空白孔吸光度(含培养基、CCK-8溶液,不含细胞、药物)。

▎注意事项 :

1. CCK-8对细胞的毒性相当低,因此细胞在CCK-8法检测后还可用于其他后续分析。

2. 如果OD值太低,可以采取适当增加细胞数量或者延长加入CCK-8后的孵育时间的办法。

3. 试剂盒依赖于脱氢酶催化的反应,影响活细胞中脱氢酶活性的条件或化学物质如还原剂会干扰检测。如果由于长期培养而改变了培养基的颜色或pH,请在添加CCK-8时更换培养基。



 


FAQ

FAQ

1. 该产品比较敏感,偶有OD值偏高的现象,应该如何处理? 

(1)用不同数目的细胞进行检测,制作标准曲线,确定合适的细胞数目;

(2)缩短加入CCK-8的孵育时间;

(3)减少CCK-8的上样量,使CCK-8稀释到合适浓度使用。

2. 如何判断本品的检测范围? 

建议用自己的不同的细胞个数先做标准曲线,根据稳定线性趋势,确定特定细胞的检测数量区间。

3. 细胞毒性实验如何设置? 

(1)100 μL细胞悬液中加入1-10 μL各种浓度的待测物质,孵育适当时间后,再加入10 μL CCK-8溶液(即总体积的10%);

(2)先将待检测物质作用细胞一段时间后,再利用CCK-8检测细胞增殖情况。

4. OD值在什么范围比较合适? 

一般情况下OD值在 0.1-2.0 都可以,在1.0附近比较好。一般可将对照孔吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液,不含药物)的OD值控制在0.8-1.0左右,确定细胞的检测数量。




说明书下载

LeanV Ultra-sensitive Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
目录号:ZZ106

LeanV Ultra-sensitive Cell Counting Kit-8(CCK-8)是基于高度水溶性的四唑盐WST-8来进行测定的。WST-8 在电子介体的作用下可被细胞中的脱氢酶还原生成水溶性甲瓒产物,产生颜色反应,其甲瓒产物为橙色,可溶于组织培养基中。CCK-8是非放射性的,可在细胞增殖和细胞毒性实验中,对活细胞进行灵敏的比色测定,从而计算出细胞数量。细胞中脱氢酶产生的甲瓒产物的量与活细胞的数量成正比,可用于检测细胞增殖和细胞毒性。CCK-8试剂检测灵敏度高于其他四唑盐(例如 MTT、XTT、MTS或WST-1)。
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