▎产品简介 ：
本产品采用全新的快速转印配方，15~40 min 即可完成Western Blot 湿转法转膜。配制过程中，可用无水乙醇替代甲醇，转膜全程产热量小，无需冰浴。在400 mA 恒流转膜15~40 min 即可将聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白转移至PVDF 膜或硝酸纤维素膜（NC 膜）等印迹膜上，产热较传统转膜缓冲液更低，对蛋白影响比较小，转膜效果与传统转膜一致或更佳。
▎产品组分 ：
| 组分 | WD409-S | WD409-L |
10x Western 快速转膜液（免冰浴、高离子型） |
500 mL | 6x 500 mL |
▎产品优势：
v 高效便捷：15-40 min 即可完成Western Blot 湿转法转膜，产热量小，无需冰浴；
v 操作安全：转膜液配制过程中，可用无水乙醇替代甲醇，避免使用有毒试剂；
v 兼容性好：适合Tris-Gly、Hepes和Bis-Tris等电泳缓冲系统的预制胶的转膜。
▎储存条件 ：
室温保存，保质期 12 个月。常温运输。
▎使用方法：
1. 1x Western快速转膜液的配制（以1 L为例）
量取100 mL的10x Western快速转膜液，倒入洁净量筒中，加入600 mL超纯水（蒸馏水/去离子水）及200 mL无水乙醇，定容至1 L，充分混匀后使用。
注意：配制过程中，请先用去离子水稀释10x Western 快速转膜液，最后再加入乙醇。
2. 转膜条件
做好转印所需的三明治结构，从负极（黑色面）到正极（红色面）顺序为海绵、滤纸、凝胶、印迹膜、滤纸、海绵，然后转移至转印槽中，采用恒流400 mA，按如下时长即可将150 k Da 以下蛋白转印完全（此条件针对厚度1.0 mm 凝胶；如凝胶厚度为0.75 mm，适当减少5 ~10min 转膜时间；如凝胶厚度为1.5 mm，适当延长5 ~10min 转膜时间）。
Western快速转膜液 | 恒流 | 凝胶浓度 | 推荐转膜时长 |
| 400mM | 6% | 15 min |
8% | 20 min |
10% | 30 min |
12% | 35 min |
▎注意事项 ：
1. 使用PVDF膜时，需提前用甲醇浸润30-60秒活化PVDF膜。
2. 若转膜时长在45 min 之内，切勿进行冰浴，否则会降低转膜效率；若超过45 min，转膜温度过高，建议加冰袋降温以保证实验效果。
3. 大于150kDa分子量的蛋白质，转膜时间需要35 min以上，根据需要适当优化转膜时间；35 min之后，可以在外槽添加冰浴来降温。
4. 本产品适用于 Tris-gly、Bis-Tris 等体系的蛋白凝胶的湿法转膜。
5. 由于不同型号的电源，其最大电流和功率差异较大。使用400mA 转膜条件时，建议电源的最大电流能达到 600mA，否则会出现过载保护情况，影响转膜的效率。
6. 本产品应为澄清透明溶液，出现浅棕色或者黄褐色，应及时丢弃勿用。
7. 本产品仅限科研使用，勿用于其他用途。
▎FAQ：
Q1. 配制1×工作液时，可以用甲醇代替乙醇吗？
可以。本产品兼容无水乙醇和甲醇。若使用甲醇，配制方法为：取100 mL 10×浓缩液，加入700 mL去离子水及200 mL甲醇，定容至1 L。甲醇挥发性和毒性较高，建议优先使用乙醇。
Q2. 转膜条件表中的时间是针对什么规格的凝胶？
针对厚度1.0 mm、浓度10%的凝胶。若凝胶厚度为0.75 mm，可适当减少时间；厚度1.5 mm或浓度大于10%，则需延长5-10分钟。
Q3. 我的电源最大电流只能到400 mA，可以用吗？
建议电源最大电流能达到600 mA以上。因为实际转膜中电流可能略有波动，如果电源以最大功率运行，容易触发过载保护，导致转膜中断或效率下降。可尝试降低电流（如300 mA）并相应延长转膜时间。
Q4. 转膜超过45分钟是否需要加冰浴？
产品优势中提到“45分钟内无需冰浴”。若转膜时间超过45分钟（例如大分子蛋白），建议在外槽添加冰浴以降低温度，保持转膜效率并减少蛋白降解风险。
Q5. 转膜后出现条带扭曲或转印不完全，可能是什么原因？
- 三明治组装时有气泡 → 用玻棒或滚轮赶尽气泡。
- 凝胶与膜之间未贴合紧密 → 检查滤纸、海绵是否过干或过湿。
- 电流或时间不足 → 根据蛋白分子量适当延长时间或提高电流（不超过500 mA）。
- 转膜液重复使用过多次 → 建议1×工作液使用不超过3次，出现沉淀或浑浊时丢弃。
Q6. 浓缩液储存一段时间后出现浅棕色，还能用吗？
不能用。产品应为澄清透明溶液，出现浅棕色或黄褐色说明已变质，应丢弃并重新配制。
Q7. 本产品可以用于半干转转膜吗？
说明书标注适用于湿转（湿法转膜）。用于半干转时效果未经充分验证，建议先进行小试，或选用专用半干转转膜液。
Q8. 转膜前需要平衡凝胶吗？
建议将电泳后的凝胶在1×工作液中浸泡1-2分钟，使凝胶从电泳环境平稳过渡到转膜环境，有助于提高转膜效率。
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