▎使用方法 :
1. 即用型产品, 电泳时加样孔孔宽小于6mm时,每次取5μL产品进行电泳,如果加样 孔较宽,可以适当增加上样量;
一、胶染法(电泳前染色,用法同 EB)
1. 配制合适浓度的琼脂糖凝胶;
2. 用微波炉加热使琼脂糖完全融化;
3. 加入 GelRed 使其终浓度为 1×(即 100 mL 凝胶中加入 10 μL GelRed 10,000×水溶液), 此时溶液呈淡粉色;
4. 将含有 1×GelRed 染液的琼脂糖溶液倒入胶槽中,插入齿梳,室温凝固;
5. 按照常规方法进行电泳;
6. 用 302 nm 激发的 UV 凝胶成像系统观察结果。
二、泡染法(电泳后染色)
1. 按照常规方法进行电泳;
2. 使用 0.1 M NaCl 溶液稀释 GelRed 染液至 3×染色液(例如将 15 μL GelRed 10,000×水溶液加入 50 mL 0.1
M NaCl 溶液中);
3. 将凝胶小心地放入合适的容器中,缓慢加入足量的 3×染色液浸没凝胶,室温摇床孵育 30 min(对于含 3.5~10%
丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝胶,需孵育 30 min~1 h,时间随着丙烯酰胺含量增加而延长。单次使用的 3×染色液
可重复使用 3 次左右,室温避光保存);
4. 用 302 nm 激发的 UV 凝胶成像系统观察结果。
▎注意事项 :
1. 染料无需低温冷藏,请于室温下避光储存,避免沉淀。若出现沉淀,请将染料置于 45~50℃ 2 min,振荡
使充分溶解后再使用;
2. 由于 GelRed 的高灵敏性, 推荐已知浓度样品的上样量为 50~200 ng/lane;
3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳请使用泡染法。
4. GelRed 不能被 488 nm 氩离子激光器(如蓝光透射仪)或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此
类激发装置的成像系统。