联纬生物-双荧光素酶报告基因检测系统｜让每一次转录活性测定都稳、准、省-北京联纬科技发展有限公司

报告基因实验的'三座大山'，你遇到过几个？

做双萤光素酶报告基因实验（Dual-Luciferase Reporter Assay）的老师同学，对这些场景一定不陌生：

- 表达量低、信号弱，信噪比低到怀疑人生；

- 结果重复性差，批间差异大，老板问起来百口莫辩；

- 试剂价格水涨船高，一个项目做下来，经费见底。

总结以上痛点很明确：报告基因检测要更灵敏、更稳定、更便宜。

——因此诞生了这款联纬生物双萤光素酶报告基因检测试剂盒，正是为此量身定做。

一、那么什么是双荧光素酶报告基因检测呢？

双荧光素酶报告基因实验（Dual-Luciferase Reporter Assay）是一种通过检测发光信号，分析基因调控关系的经典方法。它常用于启动子活性分析、转录因子调控验证、miRNA靶向关系验证以及顺式作用元件功能研究。

该实验将感兴趣基因的转录调控元件或 5'-启动子区克隆在 Luciferase 的上游，或把 3'-UTR 区克隆在 Luciferase 的下游，构建成报告基因（Reporter gene）质粒，并同时加入Renilla内参质粒。质粒进入细胞并表达后，若转录因子、miRNA或外界刺激对该序列产生调控作用，Firefly信号将发生相应变化。

1.Firefly Luciferase（萤火虫荧光素酶）：作为报告基因，用于反映目标调控序列活性；

2.Renilla Luciferase（海肾荧光素酶）：作为内参基因，用于校正转染效率、细胞状态以及实验误差。

二、双荧光素酶报告基因检测试剂盒

的工作原理是什么？

在 ATP、镁离子和氧气存在的条件下，萤火虫荧光素酶可以催化D2萤火虫荧光素氧化脱羧，生成激活态的氧化荧光素，在荧光素被氧化的过程中，会产生光信号（Firefly）。在氧气存在的条件下，海肾荧光素酶可以催化腔肠素氧化成腔肠酰胺，在腔肠素氧化的过程中也会产生光信号（Renilla）。同时检测两种荧光素酶信号，最终通常以Firefly / Renilla比值作为相对荧光活性，评价调控效应。

这两种萤光信号按照顺序激发、互不干扰，一次裂解、两步检测，把实验误差降到最低。