联纬生物-转染试剂怎么选？从机制原理到实验场景的完整决策指南速递来啦~-北京联纬科技发展有限公司

转染

试

剂

实验新手必看之

一张图搞懂转染试剂怎么选

转染效率不到30%？你可能第一步就选错了试剂

转染实验失败，80%的问题出在试剂选择上。同样的质粒，HEK293转得风生水起，换到SKOV3就全军覆没；siRNA敲低效率时高时低；原代细胞一转就死，数据根本没法看……这些场景是不是很熟悉？

市面上转染试剂从几十块的PEI到上千块的进口脂质体，从化学法到电穿孔再到病毒包装，看似选择很多，实则各有'舒适区'。选对了，实验事半功倍；选错了，weeks of work 直接归零。那么市面上的转染方案新手到底该怎么选？

关键看三点：你的细胞是什么类型？你要递送什么核酸？你的实验目的是什么？

接下来我们从主流试剂类型和核心选择因素入手，帮你快速建立选型框架，告别盲目试错。

步骤一：转染试剂速览

转染试剂主要用于辅助将外源物质如miRNA、siRNA、蛋白质或质粒DNA等输送到细胞内部。以下是几种常见的转染试剂：

一：阳离子聚合物类转染试剂

这类试剂是最早被广泛使用的一类，如Polybrene、PEI等。其原理是带正电的聚合物与带负电的核酸磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞作用进入细胞。这类试剂的优点是转染效率高、适用于多种细胞类型、RNA、DNA均可转染，可用于大规模转染；缺点则是细胞毒性较大，对于难转的细胞效率一般。

二：阳离子脂质体类转染试剂

代表性的有Lipo2000、Lipo3000、lip8000等。其原理是基于脂质体的结构特性，其带正电荷的头基与带负电荷的核酸通过静电作用形成复合物，经细胞的内吞作用进入细胞。在核酸与阳离子脂质体形成复合物的过程中，阳离子脂质体起到复合和凝集核酸的作用，同时也有助于复合物与细胞膜的结合。这类试剂的优点是转染效率最高、技术相对成熟，适合大多数实验室日常转染，一般是实验室转染首选试剂；缺点则是脂质体本身可能参与细胞生理活动造成一些非特异性调控。

三：电转孔转染

这类常用的有Neon、Nucleofector等。其原理是电穿孔利用高压电脉冲在细胞膜上形成暂时性、可逆的微孔（纳米级孔道）。电场作用下，细胞膜磷脂双分子层发生重排，通透性瞬间增加，外源核酸、蛋白质或RNP复合物通过电泳/扩散作用直接进入细胞质或细胞核。脉冲结束后，细胞膜在数秒至数分钟内自我修复，细胞恢复正常生理状态。这类转染的优点是不依赖于化学试剂，适用于大分子的递送，共转染效率高；缺点则是对细胞的损害大且价格昂贵。

四：病毒载体转染

这类是利用病毒天然感染机制，将外源基因包装进病毒颗粒，通过病毒表面蛋白与宿主细胞膜受体结合，经内吞/膜融合进入细胞，释放遗传物质，可分为慢病毒、腺病毒、AAV。这类转染的优点是可以长期稳定表达，转染效率高；缺点则是制备周期较长，生物安全等级高。

???? 新手小tips：如果没有特殊需求，建议先从阳离子脂质体入手，性价比和操作成熟度最高。联纬生物产品LeanV Lipo3.0 Ultra Transfection Reagent 就是这样一款高效的新型阳离子脂质体转染试剂。

步骤二：细胞类型观察

细胞类型决定了你能用什么类型转染试剂：