PVDF Membrane又称聚偏二氟乙烯(Polyvinylidene Fluoride, PVDF)印迹膜,具有疏水性,其均匀的孔隙结构能够结合生物分子,0.45 μm和0.22 μm两种孔径规格最为常用,主要用于免疫印迹(Immunoblotting, 即Western blot),可以将蛋白质从各种凝胶基质转移到膜上。
一、PVDF膜与NC膜的区别

(1)物理性能:PVDF膜具有较高的拉伸强度和断裂伸长率,而NC膜的拉伸强度和断裂伸长率较低。PVDF膜较为柔软,易于切割和折叠,而NC膜较为脆性,不易加工。
(2)化学稳定性:PVDF膜具有较好的耐化学性,对酸碱性物质和一些溶剂具有较好的稳定性,而NC膜则对酸碱性物质和有机溶剂比较敏感。PVDF膜具有较好的耐候性,能够在室外环境中长时间保持稳定性,而NC膜在阳光和湿度条件下容易分解。
(3)温度耐受性:PVDF膜能够在较高温度下保持稳定性,通常适用温度范围为-10℃至150℃,而NC膜的温度范围较窄,一般为-10℃至40℃之间。
(4)透明度:PVDF膜具有较高的透明度,能够允许光线透过,可用于一些光学应用,而NC膜较为乳白色,透明度较低。
(5)成本:NC膜的生产成本相对较低,适用于大规模应用和低成本需求,而PVDF膜的成本较高。
二、PVDF膜怎么用

PVDF膜本质是一种具有疏水性的聚合物,需要在使用前进行预处理活化,使其在水性缓冲液中更易使用。传统上,甲醇、乙醇常用于PVDF膜的活化,之后必须用水反复冲洗以去除醇类,经活化后的膜可放入转印缓冲液中平衡。
PVDF膜浸泡步骤
湿转:
(1) 将膜在100%甲醇中浸泡30秒。膜应均匀的从不透明变成半透明。
(2) 小心的将膜放入双蒸水中,浸泡2分钟。
(3) 小心的将膜放入转印缓冲液中,至少平衡5分钟。
半干转:
第一步甲醇浸泡只需15秒,其他步骤同上。
三、PVDF膜的转印及保存

PVDF膜转印是否成功可通过染色法来确定,PVDF膜染料分2类:可逆染料与不可逆染料。其中可逆染料在评估印迹之后可从膜上洗掉,不干扰后续的免疫检测或印迹上蛋白的其它分析。最常用的可逆蛋白染料是丽春红。可逆染料主要缺点在于它们的灵敏度不及不可逆染料。由于印迹上高丰度蛋白的染色模式通常也能很好地提示低丰度蛋白在多大程度上转移,可逆染料灵敏度不高的缺点在大部分情况下并不影响使用。
不可逆染料通常表现出最佳的灵敏度,但会干扰蛋白的进一步分析。不可逆染料有氨基黑和考马斯亮蓝等。
PVDF是一种化学耐受性好的聚合物,有着出色的长期稳定性。建议低温保存,室温对一些蛋白来说也是可以的。
步骤:
(1) 将干燥的印迹膜放在两张干净的滤纸中间。
(2) 将印迹膜-滤纸三明治放在两张卡纸之间。
(3) 用回形针夹住边缘。回形针不要压住印迹膜。
(4) 将它们放入可密封的塑料袋中。
(5) 将印迹膜保存在所需的温度:4°C 最多2周;-20°C 最多2个月;-70°C 长期保存。
四、PVDF膜怎么选?

PVDF膜被浸湿后,蛋白通过与膜的接触而实现结合。由于蛋白与膜的结合贯穿整个膜的厚度,所以结合能力是由孔的内部表面积来决定的。0.2um PVDF膜内部表面积大约是0.45um PVDF 膜的三倍,使其吸附能力更高。另外也需根据目标蛋白的大小来选择,20KD以下蛋白选用0.2um PVDF膜, 20KD以上蛋白选用0.45um PVDF膜。
联纬生物-PVDF膜优势:
转印效率高:蛋白吸附能力强,转印条带清晰
染色兼容广:本产品兼容丽春红和CBB染色
膜韧性好:干燥或湿润情况下均不易破损,易于操作和保存
联纬生物PVDF膜,片状、卷状随心选,高效转膜更方便!
五、联纬生物-PVDF膜的效果反馈


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