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小鼠(Mouse)红细胞生成素(EPO) ELISA 检测试剂盒

小鼠

货号:LV3768;
规格:48T/96T/盒;
价格:48T/¥1280, 96T/¥1980;
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。 在预包被红细胞生成素(EPO)抗体 (固相抗体) 的微孔酶标板中, 加入相应的校准品和待测样本, 再加入另一株 HRP标记的目的抗体 (酶标抗体), 经过温育与充分洗涤, 去除未结合的组分, 在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A和 B, 底物在 HRP催化下, 产生蓝色产物, 在终止液 (2M 硫酸) 作用下, 最终转化为黄色, 在酶标仪450nm波长上测定吸光度 (OD值), 吸光度 (OD值) 与待测样品中红细胞生成素(EPO)的浓度正相关。 拟合校准品曲线, 可以计算出样本中目标蛋白的浓度。

价 格 ¥1280

小鼠(Mouse)红细胞生成素(EPO) ELISA 检测试剂盒

¥1280

LV3768-48T

¥ 1280

LV3768-96T

¥ 1980

产品规格 请选择

产品详情 实验步骤 说明书

▎产品简介 :

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。 在预包被红细胞生成素(EPO)抗体 (固相抗体) 的微孔酶标板中, 加入相应的校准品和待测样本, 再加入另一株 HRP标记的目的抗体 (酶标抗体), 经过温育与充分洗涤, 去除未结合的组分, 在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A和 B, 底物在 HRP催化下, 产生蓝色产物, 在终止液 (2M 硫酸) 作用下, 最终转化为黄色, 在酶标仪450nm波长上测定吸光度 (OD值), 吸光度 (OD值) 与待测样品中红细胞生成素(EPO)的浓度正相关。 拟合校准品曲线, 可以计算出样本中目标蛋白的浓度。

▎样品收集、处理及保存方法:

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。 

3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。 

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。 

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融, 在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

▎自备物品:

1. 酶标仪(450nm) 

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 

3. 37℃恒温箱

▎注意事项 :

1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 

3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。 

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

▎储存方式:

试剂盒2-8℃保存,保质期6个月。




▎试剂准备:

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

▎洗板方法:

1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍 干,如此洗板 5 次。 

2. 自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。

▎实验步骤:

1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。 

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;

3. 样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;空白孔不加。 

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100 μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。 

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干, 如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。 

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

▎结果判读:

绘制标准曲线:在 Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应 OD 值作纵坐标,绘制出 标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。


▎免责声明:

1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验 者承担,本公司概不负责。 

2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

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产品详情

▎产品简介 :

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。 在预包被红细胞生成素(EPO)抗体 (固相抗体) 的微孔酶标板中, 加入相应的校准品和待测样本, 再加入另一株 HRP标记的目的抗体 (酶标抗体), 经过温育与充分洗涤, 去除未结合的组分, 在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A和 B, 底物在 HRP催化下, 产生蓝色产物, 在终止液 (2M 硫酸) 作用下, 最终转化为黄色, 在酶标仪450nm波长上测定吸光度 (OD值), 吸光度 (OD值) 与待测样品中红细胞生成素(EPO)的浓度正相关。 拟合校准品曲线, 可以计算出样本中目标蛋白的浓度。

▎样品收集、处理及保存方法:

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。 

3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。 

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。 

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融, 在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

▎自备物品:

1. 酶标仪(450nm) 

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 

3. 37℃恒温箱

▎注意事项 :

1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 

3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。 

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

▎储存方式:

试剂盒2-8℃保存,保质期6个月。




实验步骤

▎试剂准备:

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

▎洗板方法:

1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍 干,如此洗板 5 次。 

2. 自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。

▎实验步骤:

1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。 

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;

3. 样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;空白孔不加。 

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100 μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。 

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干, 如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。 

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

▎结果判读:

绘制标准曲线:在 Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应 OD 值作纵坐标,绘制出 标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。


▎免责声明:

1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验 者承担,本公司概不负责。 

2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

说明书

小鼠(Mouse)红细胞生成素(EPO) ELISA 检测试剂盒
货号:LV3768;
规格:48T/96T/盒;
价格:48T/¥1280, 96T/¥1980;
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。 在预包被红细胞生成素(EPO)抗体 (固相抗体) 的微孔酶标板中, 加入相应的校准品和待测样本, 再加入另一株 HRP标记的目的抗体 (酶标抗体), 经过温育与充分洗涤, 去除未结合的组分, 在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A和 B, 底物在 HRP催化下, 产生蓝色产物, 在终止液 (2M 硫酸) 作用下, 最终转化为黄色, 在酶标仪450nm波长上测定吸光度 (OD值), 吸光度 (OD值) 与待测样品中红细胞生成素(EPO)的浓度正相关。 拟合校准品曲线, 可以计算出样本中目标蛋白的浓度。
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