▎产品简介 :
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。 在预包被红细胞生成素(EPO)抗体 (固相抗体) 的微孔酶标板中, 加入相应的校准品和待测样本, 再加入另一株 HRP标记的目的抗体 (酶标抗体), 经过温育与充分洗涤, 去除未结合的组分, 在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A和 B, 底物在 HRP催化下, 产生蓝色产物, 在终止液 (2M 硫酸) 作用下, 最终转化为黄色, 在酶标仪450nm波长上测定吸光度 (OD值), 吸光度 (OD值) 与待测样品中红细胞生成素(EPO)的浓度正相关。 拟合校准品曲线, 可以计算出样本中目标蛋白的浓度。
▎样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融, 在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
▎自备物品:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
▎注意事项 :
1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
▎储存方式:
试剂盒2-8℃保存,保质期6个月。