▎使用方法：
自备蛋白酶抑制剂。RIPA 裂解液（中）在临用前需按 1:100(V/V) 加入蛋白酶抑制剂（货号：WY211），防止蛋白降解。以下使用方法中提到的 RIPA 裂解液（中）均指已添加蛋白酶抑制剂。
注：如提取的为磷酸化蛋白，还需在 RIPA 裂解液中按 1:100(V/V) 加入磷酸酶抑制剂 ( 货号：WY212),或直接使用蛋白酶磷酸酶抑制剂（货号：WY213）。
v 对于组织样本
1. 组织块用预冷 PBS（货号：XD101）洗涤，去除血污，剪成细小碎块置于匀浆器中；
2. 按照每 20 mg 组织样本加入 150~250 μL 裂解液的比例加入裂解液；用组织研磨仪或玻璃匀浆器进行低温匀浆，确保样本充分裂解；（如组织蛋白含量较低，可降低裂解液的用量，以提高粗提溶液中的蛋白浓度。）
3. 充分裂解后，10,000~14,000×g 离心 3~5 min，小心地将上清液 ( 蛋白样品 ) 移入新的离心管中，即为总蛋白溶液。
v 对于贴壁细胞
1. 弃去培养基，用 1×PBS( 或生理盐水、无血清培养液 ) 洗一遍 ( 如果血清中的蛋白对实验没有干扰，也可以不洗 )；
2. 尽可能地弃去 PBS( 多余的液体将降低裂解液的浓度 )；
3. 将所有液体转入新的离心管中；
4. 按照每 1×106 个细胞需要约 50~100 µL 的比例加入 RIPA 裂解液，比如 6 孔板每孔细胞量大约需加入 150~250 μL 裂解液。用移液器吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s 后，细胞就会被裂解；
v 对于悬浮细胞
1. 将细胞转移至离心管中，离心收集细胞，弃去培养基；
2. 用 1×PBS(或生理盐水、无血清培养液 ) 洗一遍 ( 如果血清中的蛋白对实验没有干扰，也可以不洗 )；
3. 尽可能的弃去 PBS( 多余的液体将降低裂解液的浓度 )；
4. 按照每 1×106 个细胞需要约 50~100 µL 的比例加入 RIPA 裂解液，比如 6 孔板每孔细胞量大约需加入 150~250 μL 裂解液。用移液器吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必须分装成 5×105~1×106 个细胞/管，然后再裂解；
▎注意事项 ：
1. 4℃保存时，裂解液中的SDS易析出，使用前请置于37℃完全溶解，待恢复到室温即可使用；
2. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或 4℃进行；
3. RIPA 裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，此为正常现象，该物质为基因组DNA 等形成的复合物。如不检测和基因组 DNA 紧密结合的蛋白，可以直接离心取上清用于后续实验；若需要检测此类蛋白，则可以通过超声处理打散该透明胶状物，随后离心取上清即可用于后续实验。但如果检测一些常见的转录因子，例如 NF-kappaB、p53 等，通常不必进行超声处理就可完成检测；
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
5. 本产品仅限科研使用。
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