▎产品简介 :
WB 抗体剥离缓冲液(增强型)是联纬生物生产的用于去除结合在印迹膜(PVDF 膜或 NC 膜)上的一抗和二抗的洗涤液。该产品不含有毒有味的巯基乙醇,抗体剥离能力更强,膜上蛋白损伤更小,可在不影响目的蛋白的情况下,使同一张印迹膜进行多次抗体检测。省去反复电泳和转膜等步骤,节省样品及时间,加快 Western Blot 检测实验。
▎产品组分 :
| 组分 | WB607-100mL | WB607-500mL |
WB抗体剥离缓冲液(增强型) |
100 mL | 500 mL |
▎产品优势 :
快速高效:室温洗脱时间 5-15 min。
温和配方:对膜上蛋白损伤小,洗脱后不影响蛋白质重新检测。
省时省力:无需重新制胶、点样和电泳;节省珍贵样本;减少误差。
无气味:不含硫醇,无刺激性气味。
▎储存条件 :
2-8℃ 避光保存,保质期 12 个月。
▎使用方法:
1. 完成第一次化学发光检测后,TBST 漂洗 5 min。
2. 倒掉 TBST,加入适量抗体洗脱液,确保 NC 膜或 PVDF 膜被完全覆盖,室温摇床孵育 5-15 min。
注:常规抗体剥离 10 min 即可,对于结合能力强的抗体,或当目的蛋白表达量较高导致抗体残留 较多时,可以适当延长剥离时间。
3. 倒掉抗体洗脱液,加入 TBST 漂洗三次,每次 5 min。
4. 根据实验目的进行封闭和抗体孵育等后续工作。
▎注意事项 :
1. 本产品不建议重复使用。
2. 本洗脱液有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。
3. 印迹膜接触 WB 抗体剥离缓冲液时呈现透明状,是正常现象。
4. 本产品低温下可能析出结晶沉淀,此为正常现象,置于 30-40℃水浴中促进溶解澄清后可以继续使用。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
Q1:剥离后是否会影响膜上抗原的后续检测?
A1:影响很小。本产品配方温和,对膜上蛋白的损伤较低。但建议遵循“先检测表达量低或丰度低的蛋白,剥离后再检测表达量高的蛋白”的原则,以获得最佳结果。
Q2:剥离后需要重新封闭吗?
A2:需要。剥离并漂洗后,膜上原有的封闭剂已被去除,因此需要重新进行封闭,推荐本公司的无蛋白快速封闭液(WF707)也可使用其他常规经典封闭液(如用5%脱脂奶粉或BSA),然后再进行下一轮抗体孵育。
Q3:本产品可以重复使用吗?
A3:不建议重复使用。剥离缓冲液在使用过程中会溶解掉抗体及部分封闭剂,重复使用会降低剥离效率,并可能增加背景。
Q4:使用过程中膜变透明了,是否正常?
A4:完全正常。印迹膜接触本产品后会变得透明,这是剥离液的特性,漂洗后膜会恢复原状,不影响后续实验。
Q5:低温下产品出现沉淀或结晶,还能用吗?
A5:可以。本产品在低温下可能析出结晶或沉淀,此为正常现象。使用前请将瓶子置于30-40℃水浴中加热并摇匀,待沉淀完全溶解澄清后即可正常使用。
Q6:剥离时间如何掌握?
A6:常规抗体室温孵育10分钟即可达到良好剥离效果。对于结合能力特别强的抗体,或当一抗浓度较高导致抗体残留较多时,可适当延长至15分钟。不建议超过20分钟,以免对膜蛋白造成不必要的影响。
Q7:剥离后如何判断抗体是否已被完全去除?
A7:建议在剥离并漂洗后,重新加入ECL发光液进行显影检测(不孵育一抗和二抗)。若无信号或信号极弱,说明剥离彻底;若仍有明显信号,可重复剥离一次。